Бластоциста и бластомеры

Начальный этап формирования эмбриона — самый сложный процесс, от которого во многом зависит успех всей процедуры. Рассмотрим пошагово образование бластомеров, факторы, влияющие на их развитие, условия отбора материала.

Формирование

Что такое бластомеры? Это округлые клетки эмбрионов у многоклеточных видов. В результате оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом формируется зигота. Две одинаковые клетки — бластомеры, образуются в процессе развития клеточного цикла (он занимает приблизительно 24 часа).

Дальнейшее дробление также естественно: клетки внешней оболочки морулы трансформируются в эпителиальные, что становится толчком к наполнению межклеточного пространства водой, ионами. В результате таких изменений возникает полость — бластоцель. После ее формирования материал, полученный в результате оплодотворения — это бластоциста или бластула.

Дифференцировка бластомеров начинается на стадии, наступающей через 24 часа и далее различается по временным отрезкам и количеству клеток:

• 2-е сутки — стадия 2-4 бластомеров (реже 6-8). В этот период с высокой точностью можно отобрать эмбрионы, развивающиеся нормально.
• 3-4-е сутки — стадия 6-8 (реже 8-16) бластомеров. Эмбрион, полученный вследствие оплодотворения, после стадии 12-14 бластомеров становится округлым и с гладкой поверхностью. На этом этапе контакты между клетками укрепляются и бластомер называют морулой. В условиях природного оплодотворения именно в это время материал переносится в матку.
• 5-е сутки — стадия 16 и более бластомеров. Бластоциста выклевывается из истончившейся оболочки, и наступает стадия имплантации.
• Бластоциста на 6-й день  — полностью освободившаяся из оболочки.

Характеристика дробления и строение бластоцисты человека:

Образование бластомеров: митоз или мейоз? Дробление — поэтапное деление зиготы путем митоза. За короткие отрезки времени между дроблением, роста клеток не происходит, но ДНК удваивается. Клетка уменьшается до нормального размера, образуется шарообразное скопление клеток — морула, а после — бластоциста — полый шарик из бластомеров.

На современном этапе развития методики экстракорпорального оплодотворения можно отобрать хорошо развивающиеся эмбрионы до момента имплантации, что позволяет сделать манипуляцию максимально успешной.

Классификация

Классификация бластоцист сформирована по ряду признаков, чтобы в дальнейшем можно было отобрать наилучший материал. Для удобства дифференциации используют цифровые и буквенные обозначения.

Размер указывают с помощью цифр от 1 до 6 (обозначение стадии экспансии):

• Полость занимает приблизительно половину бластоцисты (ранняя стадия).
• Полость — больше половины объема, но при том сама бластоциста незначительно превышает размеры делящегося эмбриона (средняя стадия).
• Полость — большая часть бластулы. Объем бластоцисты вдвое превышает размеры делящегося эмбриона, оболочка становится тоньше
• Стадия разрыва оболочки (хэтчинга).
• Стадия разрыва оболочки после осуществления ПГД (преимплантационной генетической диагностики).
• Вылупившаяся бластула.

После цифрового обозначения используют буквенные. Первая буква обозначает уровень качества внутриклеточной массы (объема, из которого в будущем развивается эмбрион — ВКМ):

• А — нормальная по размеру и плотно упакованная масса без включений;
• В — внутриклеточная масса имеет дефекты при хорошей различимости;
• С — ВКМ с серьезными дефектами структуры или неразличима;
• D — дегенеративная внутренняя клеточная масса.

Вторая буква обозначения указывает на качество трофобласта:

• А — слой многоклеточный, однослойный и хорошо организован;
• В — состоит из более чем 1 слоя, клетки неравномерно распределены иди их количество — меньше нормы;
• С — слишком малое количество клеток, имеются включения;
• D — дегенеративный клеточный слой.

В международной классификации к числовому обозначению добавляют 0. Эта стадия экспансии расшифровывается как поздняя морула, отсутствие полости. Буквенные обозначения ограничиваются пунктами А, В, С, дегенеративные признаки не выделяют.

Фото бластоцист различных классов:

Пример расшифровки:

• 4АА — бластоциста в стадии естественного хэтчинга, внутриклеточная масса нормального размера, плотная и без включений. Трофобласт хорошо организован, многоклеточный и однослойный.
• ЗВВ — оболочка истончена, полость занимает большую часть бластоцисты. ВКМ хорошо различима, имеет дефекты. Клетки трофобласта неравномерно размещены (в несколько слоев) или же их количество — меньше нормы.

На какой день происходит имплантация бластоцисты? Время определяется индивидуально и зависит от показателей, выявленных при обследовании женщины. Оптимальное время для имплантации — 5-6 сутки; при слабой овуляции манипуляцию осуществляют на 2-3 день.

Качество

Основное влияние на уровень качества эмбриона оказывает полноценность мужских и женских половых клеток. На их формирование негативно могут повлиять такие факторы:

• неблагоприятная экологическая ситуация;
• интоксикация организма;
• ослабление защитной системы организма;
• хроническое переутомление;
• ожирение;
• несбалансированное питание;
• гинекологические болезни;
• неблагоприятный радиационный фон;
• хронический стресс в результате систематической смены часовых поясов, климатических зон;
• стимуляция овуляции гормонами.

Для того чтобы уменьшить негативное влияние на материал, нужно избегать факторов риска, а также строго следовать предписаниям врача на этапе подготовки к ЭКО.

Качество эмбрионов может быть плохое и по другим причинам. Методика экстракорпорального оплодотворения определяет такие группы факторов, как неконтролируемые (или эмбриональные) и внешние.

К эмбриональной группе относят:

• Хромосомные нарушения.
• Сложность прогнозирования характеристик трехдневных и пятидневных эмбрионов. В качестве дополнительного исследования применяют преимплантационную генетическую диагностику (ПГД) — метод, позволяющий отбраковать некачественный материал. Но проверка осуществляется не всегда, к ней прибегают только в том случае, если предыдущие попытки ЭКО были неудачными.
• Нарушения в структуре клеток (дефекты нитей хромосом, митохондрий).
• Сбой в активации генома. Нарушение происходит на 3 сутки, из-за чего качество материала существенно ухудшается, или же деление вовсе прекращается. Именно по причине такого риска отдают предпочтение подсадке на 5-6 день, когда опасность уже не угрожает.

Внешние факторы:

• Технические возможности лаборатории.
• Среда для культивации бластомеров (влияет на развитие и качество эмбрионов, а также их приживаемость).
• Состав воздуха.
• Режим температуры окружающей среды.
• Бесперебойное функционирование инкубаторов.
• Профессионализм медперсонала.
• Внешние факторы, влияющие на качество материала, можно корректировать, поэтому, решив обратится за помощью в клинику, изучите технические возможности лаборатории и обратите внимание на уровень квалификации медиков.

ЭКО — современная процедура, позволяющая наблюдать за развитием материала еще до имплантации бластоцисты. Такая возможность делает реальным отбор самых жизнеспособных, развивающихся правильно эмбрионов. Но не стоит огорчаться, если эмбрионы оказались не очень хорошего качества по результатам оценки. Классификация достаточно условна. Очень часто бывает так, что качественные бластоцисты погибают, а имплантируются именно те, что по результату оценки были плохими. И дети рождаются полностью здоровыми.